Dankie dat u nature.com besoek het. Die blaaierweergawe wat u gebruik, het beperkte CSS-ondersteuning. Vir die beste ervaring beveel ons aan dat u die nuutste blaaierweergawe gebruik (of versoenbaarheidsmodus in Internet Explorer afskakel). Daarbenewens, om voortgesette ondersteuning te verseker, sal hierdie webwerf nie style of JavaScript insluit nie.
Melamine is 'n erkende voedselkontaminant wat in sekere voedselkategorieë teenwoordig kan wees, beide per ongeluk en opsetlik. Die doel van hierdie studie was om die opsporing en kwantifisering van melamien in babaformule en melkpoeier te verifieer. 'n Totaal van 40 kommersieel beskikbare voedselmonsters, insluitend babaformule en melkpoeier, uit verskillende streke van Iran is geanaliseer. Die benaderde melamieninhoud van die monsters is bepaal met behulp van 'n hoëprestasievloeistofchromatografie-ultraviolet (HPLC-UV) stelsel. 'n Kalibrasiekurwe (R2 = 0.9925) is gekonstrueer vir die opsporing van melamien in die reeks van 0.1–1.2 μg mL−1. Die limiete van kwantifisering en opsporing was onderskeidelik 1 μg mL−1 en 3 μg mL−1. Melamien is in babaformule en melkpoeier getoets en die resultate het getoon dat melamienvlakke in die babaformule- en melkpoeiermonsters onderskeidelik 0.001–0.095 mg kg−1 en 0.001–0.004 mg kg−1 was. Hierdie waardes is in lyn met EU-wetgewing en die Codex Alimentarius. Dit is belangrik om daarop te let dat die verbruik van hierdie melkprodukte met verminderde melamieninhoud nie 'n beduidende risiko vir verbruikersgesondheid inhou nie. Dit word ook ondersteun deur die resultate van die risikobepaling.
Melamien is 'n organiese verbinding met die molekulêre formule C3H6N6, afgelei van siaanamied. Dit het 'n baie lae oplosbaarheid in water en is ongeveer 66% stikstof. Melamien is 'n wyd gebruikte industriële verbinding met 'n wye reeks wettige gebruike in die produksie van plastiek, kunsmis en voedselverwerkingstoerusting (insluitend voedselverpakking en kombuisware)1,2. Melamien word ook as 'n geneesmiddeldraer gebruik vir die behandeling van siektes. Die hoë proporsie stikstof in melamien kan lei tot misbruik van die verbinding en die oordra van die eienskappe van proteïenmolekules aan voedselbestanddele3,4. Daarom verhoog die byvoeging van melamien tot voedselprodukte, insluitend suiwelprodukte, die stikstofinhoud. Dus is die verkeerdelike gevolgtrekking gemaak dat die proteïeninhoud van melk hoër was as wat dit werklik was.
Vir elke gram melamien wat bygevoeg word, sal die proteïeninhoud van voedsel met 0,4% toeneem. Melamien is egter hoogs oplosbaar in water en kan meer ernstige skade veroorsaak. Die byvoeging van 1,3 gram melamien by vloeibare produkte soos melk kan die melk se proteïeninhoud met 30% verhoog5,6. Alhoewel melamien by dierlike en selfs menslike voedsel gevoeg word om die proteïeninhoud7 te verhoog, het die Codex Alimentarius-kommissie (CAC) en nasionale owerhede melamien nie as 'n voedseladditief goedgekeur nie en dit as gevaarlik gelys indien dit ingesluk, ingeasem of deur die vel geabsorbeer word. In 2012 het die Wêreldgesondheidsorganisasie (WGO) se Internasionale Agentskap vir Kankernavorsing melamien as 'n Klas 2B-karsinogeen gelys omdat dit skadelik vir menslike gesondheid8 kan wees. Langtermyn blootstelling aan melamien kan kanker of nierskade2 veroorsaak. Melamien in voedsel kan met sianiuriensuur komplekseer om water-onoplosbare geel kristalle te vorm wat skade aan nier- en blaasweefsel kan veroorsaak, sowel as urienwegkanker en gewigsverlies9,10. Dit kan akute voedselvergiftiging en, in hoë konsentrasies, die dood veroorsaak, veral by babas en jong kinders.11 Die Wêreldgesondheidsorganisasie (WGO) het ook die verdraagsame daaglikse inname (TDG) van melamien vir mense vasgestel op 0,2 mg/kg liggaamsgewig per dag gebaseer op CAC-riglyne.12 Die Amerikaanse Voedsel- en Medisyne-administrasie (VSA FDA) het die maksimum residuvlak vir melamien vasgestel op 1 mg/kg in babaformule en 2,5 mg/kg in ander voedselsoorte.2,7 In September 2008 is berig dat verskeie plaaslike babaformulevervaardigers melamien by melkpoeier gevoeg het om die proteïeninhoud van hul produkte te verhoog, wat gelei het tot melkpoeiervergiftiging en 'n landwye melamienvergiftigingsvoorval veroorsaak het wat meer as 294 000 kinders siek gemaak het en meer as 50 000 in die hospitaal opgeneem het. 13
Borsvoeding is nie altyd moontlik nie as gevolg van verskeie faktore soos die probleme van die stedelike lewe, siekte van die moeder of kind, wat lei tot die gebruik van babaformule om babas te voed. Gevolglik is fabrieke opgerig om babaformule te produseer wat so na as moontlik aan borsmelk in samestelling is14. Babaformule wat in die mark verkoop word, word gewoonlik van koeimelk gemaak en word gewoonlik gemaak met 'n spesiale mengsel van vette, proteïene, koolhidrate, vitamiene, minerale en ander verbindings. Om na aan borsmelk te wees, wissel die proteïen- en vetinhoud van die formule, en afhangende van die tipe melk, word dit verryk met verbindings soos vitamiene en minerale soos yster15. Aangesien babas 'n sensitiewe groep is en daar 'n risiko van vergiftiging is, is die veiligheid van melkpoeierverbruik van kardinale belang vir die gesondheid. Na die melamienvergiftigingsgeval onder Chinese babas het lande regoor die wêreld noukeurig aandag aan hierdie kwessie gegee, en die sensitiwiteit van hierdie gebied het ook toegeneem. Daarom is dit veral belangrik om die beheer van babaformuleproduksie te versterk om die gesondheid van babas te beskerm. Daar is verskeie metodes vir die opsporing van melamien in voedsel, insluitend hoëprestasievloeistofchromatografie (HPLC), elektroforese, sensoriese metode, spektrofotometrie en antigeen-teenliggaam ensiemgekoppelde immunosorbent-toets16. In 2007 het die Amerikaanse Voedsel- en Medisyne-administrasie (FDA) 'n HPLC-metode ontwikkel en gepubliseer vir die bepaling van melamien en sianiuriensuur in voedsel, wat die mees effektiewe metode is vir die bepaling van melamieninhoud17.
Melamienkonsentrasies in babaformule gemeet met behulp van 'n nuwe infrarooispektroskopietegniek het gewissel van 0,33 tot 0,96 milligram per kilogram (mg kg-1). 18 'n Studie in Sri Lanka het bevind dat melamienvlakke in volmelkpoeier wissel van 0,39 tot 0,84 mg kg-1. Daarbenewens het ingevoerde babaformulemonsters die hoogste vlakke van melamien bevat, onderskeidelik 0,96 en 0,94 mg/kg. Hierdie vlakke is onder die regulatoriese limiet (1 mg/kg), maar 'n moniteringsprogram is nodig vir verbruikersveiligheid. 19
Verskeie studies het die vlakke van melamien in Iranse babaformules ondersoek. Ongeveer 65% van die monsters het melamien bevat, met 'n gemiddelde van 0,73 mg/kg en 'n maksimum van 3,63 mg/kg. 'n Ander studie het berig dat die vlak van melamien in babaformule gewissel het van 0,35 tot 3,40 μg/kg, met 'n gemiddelde van 1,38 μg/kg. Oor die algemeen is die teenwoordigheid en vlak van melamien in Iranse babaformules in verskeie studies beoordeel, met sommige monsters wat melamien bevat wat die maksimum limiet wat deur die regulerende owerhede gestel is (2,5 mg/kg/voer) oorskry.
In die lig van die enorme direkte en indirekte verbruik van melkpoeier in die voedselbedryf en die besondere belangrikheid van babaformule in die voeding van kinders, het hierdie studie ten doel gehad om die opsporingsmetode van melamien in melkpoeier en babaformule te valideer. Trouens, die eerste doelwit van hierdie studie was om 'n vinnige, eenvoudige en akkurate kwantitatiewe metode te ontwikkel vir die opsporing van melamienvervalsing in babaformule en melkpoeier deur gebruik te maak van hoëprestasievloeistofchromatografie (HPLC) en ultraviolet (UV) opsporing; Tweedens, die doelwit van hierdie studie was om die melamieninhoud in babaformule en melkpoeier wat in die Iranse mark verkoop word, te bepaal.
Die instrumente wat vir melamienanalise gebruik word, wissel na gelang van die voedselproduksieligging. 'n Sensitiewe en betroubare HPLC-UV-analisemetode is gebruik om melamienresidue in melk en babaformule te meet. Suiwelprodukte bevat verskeie proteïene en vette wat melamienmeting kan beïnvloed. Daarom, soos opgemerk deur Sun et al. 22, is 'n gepaste en effektiewe skoonmaakstrategie nodig voor instrumentele analise. In hierdie studie het ons weggooibare spuitfilters gebruik. In hierdie studie het ons 'n C18-kolom gebruik om melamien in babaformule en melkpoeier te skei. Figuur 1 toon die chromatogram vir melamienopsporing. Daarbenewens het die herwinning van die monsters wat 0.1–1.2 mg/kg melamien bevat, gewissel van 95% tot 109%, die regressievergelyking was y = 1.2487x − 0.005 (r = 0.9925), en die relatiewe standaardafwyking (RSD) waardes het gewissel van 0.8 tot 2%. Die beskikbare data dui daarop dat die metode betroubaar is in die bestudeerde konsentrasiebereik (Tabel 1). Die instrumentele deteksielimiet (LOD) en kwantifiseringslimiet (LOQ) van melamien was onderskeidelik 1 μg mL−1 en 3 μg mL−1. Daarbenewens het die UV-spektrum van melamien 'n absorpsieband by 242 nm vertoon. Die deteksiemetode is sensitief, betroubaar en akkuraat. Hierdie metode kan gebruik word vir roetinebepaling van melamienvlak.
Soortgelyke resultate is deur verskeie outeurs gepubliseer. 'n Hoëprestasie-vloeistofchromatografie-fotodiode-skikking (HPLC) metode is ontwikkel vir die analise van melamien in suiwelprodukte. Die onderste kwantifiseringslimiete was 340 μg kg−1 vir melkpoeier en 280 μg kg−1 vir babaformule teen 240 nm. Filazzi et al. (2012) het berig dat melamien nie in babaformule deur HPLC opgespoor is nie. 8% van die melkpoeiermonsters het egter melamien bevat teen 'n vlak van 0.505–0.86 mg/kg. Tittlemiet et al.23 het 'n soortgelyke studie uitgevoer en die melamieninhoud van babaformule (monsternommer: 72) deur hoëprestasie-vloeistofchromatografie-massaspektrometrie/MS (HPLC-MS/MS) bepaal op ongeveer 0.0431–0.346 mg kg−1. In 'n studie wat deur Venkatasamy et al. uitgevoer is. (2010) is 'n groenchemie-benadering (sonder asetonitriel) en omgekeerde-fase hoëprestasievloeistofchromatografie (RP-HPLC) gebruik om melamien in babaformule en melk te skat. Die monsterkonsentrasiebereik was van 1.0 tot 80 g/mL en die respons was lineêr (r > 0.999). Die metode het herwinnings van 97.2–101.2 oor die konsentrasiebereik van 5–40 g/mL getoon en die reproduceerbaarheid was minder as 1.0% relatiewe standaardafwyking. Verder was die waargenome LOD en LOQ onderskeidelik 0.1 g mL−1 en 0.2 g mL−124. Lutter et al. (2011) het melamienkontaminasie in koeimelk en melkgebaseerde babaformule bepaal met behulp van HPLC-UV. Melamienkonsentrasies het gewissel van < 0.2 tot 2.52 mg kg−1. Die lineêre dinamiese omvang van die HPLC-UV-metode was 0,05 tot 2,5 mg kg−1 vir koeimelk, 0,13 tot 6,25 mg kg−1 vir babaformule met 'n proteïenmassafraksie van <15%, en 0,25 tot 12,5 mg kg−1 vir babaformule met 'n proteïenmassafraksie van 15%. Die LOD (en LOQ) resultate was 0,03 mg kg−1 (0,09 mg kg−1) vir koeimelk, 0,06 mg kg−1 (0,18 mg kg−1) vir babaformule <15% proteïen, en 0,12 mg kg−1 (0,36 mg kg−1) vir babaformule 15% proteïen, met 'n sein-tot-ruis-verhouding van 3 en 1025 vir LOD en LOQ, onderskeidelik. Diebes et al. (2012) het melamienvlakke in babaformule- en melkpoeiermonsters ondersoek met behulp van HPLC/DMD. In babamelkformule was die laagste en hoogste vlakke onderskeidelik 9,49 mg kg−1 en 258 mg kg−1. Die deteksielimiet (LOD) was 0,05 mg kg−1.
Javaid et al. het berig dat melamienresidue in babaformule in die reeks van 0.002–2 mg kg−1 was deur Fourier-transform infrarooispektroskopie (FT-MIR) (LOD = 1 mg kg−1; LOQ = 3.5 mg kg−1). Rezai et al.27 het 'n HPLC-DDA (λ = 220 nm) metode voorgestel om melamien te skat en het 'n LOQ van 0.08 μg mL−1 vir melkpoeier behaal, wat laer was as die vlak wat in hierdie studie verkry is. Sun et al. het 'n RP-HPLC-DAD ontwikkel vir die opsporing van melamien in vloeibare melk deur vastefase-ekstraksie (SPE). Hulle het onderskeidelik 'n LOD en LOQ van 18 en 60 μg kg−128 verkry, wat meer sensitief is as die huidige studie. Montesano et al. het die doeltreffendheid van die HPLC-DMD-metode vir die assessering van melamieninhoud in proteïenaanvullings bevestig met 'n kwantifiseringslimiet van 0,05–3 mg/kg, wat minder sensitief was as die metode wat in hierdie studie gebruik is29.
Analitiese laboratoriums speel ongetwyfeld 'n belangrike rol in die beskerming van die omgewing deur besoedelingstowwe in verskeie monsters te monitor. Die gebruik van 'n groot aantal reagense en oplosmiddels tydens analise kan egter lei tot die vorming van gevaarlike residue. Daarom is groen analitiese chemie (GAC) in 2000 ontwikkel om die nadelige gevolge van analitiese prosedures op operateurs en die omgewing te verminder of uit te skakel26. Tradisionele melamienopsporingsmetodes, insluitend chromatografie, elektroforese, kapillêre elektroforese en ensiemgekoppelde immunosorbent-toets (ELISA), is gebruik om melamien te identifiseer. Onder die talle opsporingsmetodes het elektrochemiese sensors egter baie aandag getrek as gevolg van hul uitstekende sensitiwiteit, selektiwiteit, vinnige analisetyd en gebruikersvriendelike eienskappe30,31. Groen nanotegnologie gebruik biologiese weë om nanomateriale te sintetiseer, wat die opwekking van gevaarlike afval en energieverbruik kan verminder en sodoende die implementering van volhoubare praktyke bevorder. Nanokomposiete, byvoorbeeld, gemaak van omgewingsvriendelike materiale, kan in biosensors gebruik word om stowwe soos melamien32,33,34 op te spoor.
Die studie toon dat vastefase-mikroekstraksie (SPME) effektief gebruik word as gevolg van sy hoër energie-doeltreffendheid en volhoubaarheid in vergelyking met tradisionele ekstraksiemetodes. Die omgewingsvriendelikheid en energie-doeltreffendheid van SPME maak dit 'n uitstekende alternatief vir tradisionele ekstraksiemetodes in analitiese chemie en bied 'n meer volhoubare en doeltreffende metode vir monstervoorbereiding35.
In 2013 het Wu et al. 'n hoogs sensitiewe en selektiewe oppervlakplasmonresonansie (mini-SPR) biosensor ontwikkel wat die koppeling tussen melamien en anti-melamien-teenliggaampies gebruik om melamien vinnig in babaformule op te spoor deur middel van 'n immunotoets. Die SPR-biosensor gekombineer met 'n immunotoets (wat melamien-gekonjugeerde beeserumalbumien gebruik) is 'n maklik-om-te-gebruik en laekoste-tegnologie met 'n deteksielimiet van slegs 0.02 μg mL-136.
Nasiri en Abbasian het 'n hoëpotensiaal draagbare sensor in kombinasie met grafeenoksied-chitosan-komposiete (GOCS) gebruik om melamien in kommersiële monsters37 op te spoor. Hierdie metode het ultrahoë selektiwiteit, akkuraatheid en respons getoon. Die GOCS-sensor het merkwaardige sensitiwiteit (239.1 μM−1), 'n lineêre reeks van 0.01 tot 200 μM, 'n affiniteitskonstante van 1.73 × 104, en 'n LOD van tot 10 nM getoon. Verder het 'n studie wat in 2024 deur Chandrasekhar et al. uitgevoer is, 'n omgewingsvriendelike en koste-effektiewe benadering gevolg. Hulle het papaja-skil-ekstrak as 'n reduseermiddel gebruik om sinkoksied-nanopartikels (ZnO-NP's) in 'n omgewingsvriendelike metode te sintetiseer. Vervolgens is 'n unieke mikro-Raman-spektroskopietegniek ontwikkel vir die bepaling van melamien in babaformule. ZnO-NP's afgelei van landbouafval het potensiaal getoon as 'n waardevolle diagnostiese instrument en 'n betroubare, laekoste-tegnologie vir die monitering en opsporing van melamien38.
Alizadeh et al. (2024) het 'n hoogs sensitiewe metaal-organiese raamwerk (MOF) fluoresensieplatform gebruik om melamien in melkpoeier te bepaal. Die lineêre reikwydte en onderste deteksielimiet van die sensor, bepaal met behulp van 3σ/S, was onderskeidelik 40 tot 396.45 nM (gelykstaande aan 25 μg kg−1 tot 0.25 mg kg−1) en 40 nM (gelykstaande aan 25 μg kg−1). Hierdie reikwydte is heelwat laer as die maksimum residuvlakke (MRL's) wat gestel is vir die identifisering van melamien in babaformule (1 mg kg−1) en ander voedsel-/voermonsters (2.5 mg kg−1). Die fluoresserende sensor (terbium (Tb)@NH2-MIL-253(Al)MOF) het hoër akkuraatheid en meer presiese meetvermoë as HPLC39 getoon in die opsporing van melamien in melkpoeier. Biosensors en nanokomposiete in groen chemie verbeter nie net deteksievermoëns nie, maar verminder ook omgewingsgevare in lyn met volhoubare ontwikkelingsbeginsels.
Groen chemie-beginsels is toegepas op verskeie metodes vir die bepaling van melamien. Een benadering is die ontwikkeling van 'n groen dispersiewe vastefase-mikroekstraksiemetode met behulp van die natuurlike polêre polimeer β-siklodekstrien wat met sitroensuur gekruisbind is vir die doeltreffende ekstraksie van melamien 40 uit monsters soos babaformule en warm water. 'n Ander metode gebruik die Mannich-reaksie vir die bepaling van melamien in melkmonsters. Hierdie metode is goedkoop, omgewingsvriendelik en hoogs akkuraat met 'n lineêre reeks van 0.1–2.5 dpm en 'n lae deteksielimiet 41. Verder is 'n koste-effektiewe en omgewingsvriendelike metode vir die kwantitatiewe bepaling van melamien in vloeibare melk en babaformule ontwikkel met behulp van Fourier-transform infrarooi transmissiespektroskopie met hoë akkuraatheid en deteksielimiete van onderskeidelik 1 dpm en 3.5 dpm 42. Hierdie metodes demonstreer die toepassing van groen chemie-beginsels op die ontwikkeling van doeltreffende en volhoubare metodes vir die bepaling van melamien.
Verskeie studies het innoverende metodes vir melamienopsporing voorgestel, soos die gebruik van vastefase-ekstraksie en hoëprestasievloeistofchromatografie (HPLC)43, sowel as vinnige hoëprestasievloeistofchromatografie (HPLC), wat nie komplekse voorbehandeling of ioonpaarreagense benodig nie, en sodoende die hoeveelheid chemiese afval44 verminder. Hierdie metodes verskaf nie net akkurate resultate vir die bepaling van melamien in suiwelprodukte nie, maar voldoen ook aan die beginsels van groen chemie, wat die gebruik van gevaarlike chemikalieë tot die minimum beperk en die algehele omgewingsimpak van die analitiese proses verminder.
Veertig monsters van verskillende handelsmerke is in drievoud getoets, en die resultate word in Tabel 2 aangebied. Melamienvlakke in die babaformule- en melkpoeiermonsters het gewissel van 0.001 tot 0.004 mg/kg en van 0.001 tot 0.095 mg/kg, onderskeidelik. Geen beduidende veranderinge is waargeneem tussen die drie ouderdomsgroepe van babaformule nie. Daarbenewens is melamien in 80% van die melkpoeier opgespoor, maar 65% van die babaformules was met melamien besmet.
Die melamieninhoud in industriële melkpoeier was hoër as in babaformule, en die verskil was beduidend (p<0.05) (Figuur 2).
Die resultate wat verkry is, was onder die perke wat deur die FDA gestel is (onder 1 en 2.5 mg/kg). Boonop is die resultate in lyn met die perke wat deur die CAC (2010) en die EU45,46 gestel is, d.w.s. die maksimum toegelate limiet is 1 mg kg-1 vir babaformule en 2.5 mg kg-1 vir suiwelprodukte.
Volgens 'n 2023-studie deur Ghanati et al.47, het die melamieninhoud in verskillende soorte verpakte melk in Iran gewissel van 50,7 tot 790 μg kg−1. Hul resultate was onder die FDA-toelaatbare limiet. Ons resultate is laer as dié van Shoder et al.48 en Rima et al.49. Shoder et al. (2010) het bevind dat melamienvlakke in melkpoeier (n=49) bepaal deur ELISA gewissel het van 0,5 tot 5,5 mg/kg. Rima et al. het melamienresidue in melkpoeier deur fluoresensie-spektrofotometrie geanaliseer en bevind dat die melamieninhoud in melkpoeier 0,72–5,76 mg/kg was. 'n Studie is in 2011 in Kanada uitgevoer om melamienvlakke in babaformule (n=94) te monitor met behulp van vloeistofchromatografie (LC/MS). Melamienkonsentrasies is gevind om onder die aanvaarbare limiet te wees (voorlopige standaard: 0,5 mg kg−1). Dit is onwaarskynlik dat die bedrieglike melamienvlakke wat opgespoor is, 'n taktiek was wat gebruik is om die proteïeninhoud te verhoog. Dit kan egter nie verklaar word deur die gebruik van kunsmis, die verskuiwing van houerinhoud of soortgelyke faktore nie. Verder is die bron van melamien in melkpoeier wat na Kanada ingevoer word, nie bekend gemaak nie.50
Hassani et al. het die melamieninhoud in melkpoeier en vloeibare melk in die Iranse mark in 2013 gemeet en soortgelyke resultate gevind. Die resultate het getoon dat, behalwe vir een handelsmerk melkpoeier en vloeibare melk, alle ander monsters met melamien besmet was, met vlakke wat wissel van 1,50 tot 30,32 μg g−1 in melkpoeier en 0,11 tot 1,48 μg ml−1 in melk. Dit is opmerklik dat sianiuriensuur nie in enige van die monsters opgespoor is nie, wat die moontlikheid van melamienvergiftiging vir verbruikers verminder. 51 Vorige studies het die melamienkonsentrasie in sjokoladeprodukte wat melkpoeier bevat, beoordeel. Ongeveer 94% van ingevoerde monsters en 77% van Iranse monsters het melamien bevat. Melamienvlakke in ingevoerde monsters het gewissel van 0,032 tot 2,692 mg/kg, terwyl dié in Iranse monsters gewissel het van 0,013 tot 2,600 mg/kg. Oor die algemeen is melamien in 85% van die monsters opgespoor, maar slegs een spesifieke handelsmerk het vlakke bo die toelaatbare limiet gehad.44 Tittlemier et al. het melamienvlakke in melkpoeier gerapporteer wat wissel van 0.00528 tot 0.0122 mg/kg.
Tabel 3 som die risikobepalingsresultate vir die drie ouderdomsgroepe op. Die risiko was minder as 1 in alle ouderdomsgroepe. Dus is daar geen nie-karsinogeen gesondheidsrisiko van melamien in babaformule nie.
Laer vlakke van kontaminasie in suiwelprodukte kan te wyte wees aan onbedoelde kontaminasie tydens voorbereiding, terwyl hoër vlakke te wyte kan wees aan opsetlike byvoegings. Verder word die algehele risiko vir menslike gesondheid as gevolg van die verbruik van suiwelprodukte met lae melamienvlakke as laag beskou. Daar kan tot die gevolgtrekking gekom word dat die verbruik van produkte wat sulke lae vlakke van melamien bevat, geen risiko vir verbruikersgesondheid inhou nie52.
In die lig van die belangrikheid van voedselveiligheidsbestuur in die suiwelbedryf, veral in terme van die beskerming van openbare gesondheid, is dit van die uiterste belang om 'n metode te ontwikkel en te valideer vir die assessering en vergelyking van melamienvlakke en -residue in melkpoeier en babaformule. 'n Eenvoudige en akkurate HPLC-UV-spektrofotometriese metode is ontwikkel vir die bepaling van melamien in babaformule en melkpoeier. Die metode is gevalideer om die betroubaarheid en akkuraatheid daarvan te verseker. Die opsporings- en kwantifiseringslimiete van die metode is sensitief genoeg getoon om melamienvlakke in babaformule en melkpoeier te meet. Volgens ons data is melamien in die meeste van die Iranse monsters opgespoor. Alle opgespoorde melamienvlakke was onder die maksimum toelaatbare perke wat deur die CAC gestel is, wat aandui dat die verbruik van hierdie tipe suiwelprodukte nie 'n risiko vir menslike gesondheid inhou nie.
Alle chemiese reagense wat gebruik is, was van analitiese graad: melamien (2,4,6-triamino-1,3,5-triasien) 99% suiwer (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO); HPLC-graad asetonitriel (Merck, Darmstadt, Duitsland); ultrasuiwer water (Millipore, Morfheim, Frankryk). Weggooibare spuitfilters (Chromafil Xtra PVDF-45/25, poriegrootte 0.45 μm, membraandiemeter 25 mm) (Macherey-Nagel, Düren, Duitsland).
'n Ultrasoniese bad (Elma, Duitsland), 'n sentrifuge (Beckman Coulter, Krefeld, Duitsland) en HPLC (KNAUER, Duitsland) is gebruik om die monsters voor te berei.
'n Hoëprestasievloeistofchromatograaf (KNAUER, Duitsland) toegerus met 'n UV-detektor is gebruik. Die HPLC-analisetoestande was soos volg: 'n UHPLC Ultimate-stelsel toegerus met 'n ODS-3 C18 analitiese kolom (4.6 mm × 250 mm, deeltjiegrootte 5 μm) (MZ, Duitsland) is gebruik. Die HPLC-eluent (mobiele fase) was 'n TFA/metanolmengsel (450:50 mL) met 'n vloeitempo van 1 mL min-1. Die deteksiegolflengte was 242 nm. Die inspuitvolume was 100 μL, die kolomtemperatuur was 20 °C. Aangesien die retensietyd van die geneesmiddel lank is (15 minute), moet die volgende inspuiting na 25 minute gemaak word. Melamien is geïdentifiseer deur die retensietyd en die UV-spektrumpiek van melamienstandaarde te vergelyk.
'n Standaardoplossing van melamien (10 μg/mL) is met water voorberei en in 'n yskas (4 °C) weg van lig gestoor. Verdun die voorraadoplossing met die mobiele fase en berei werkstandaardoplossings voor. Elke standaardoplossing is 7 keer in die HPLC ingespuit. Die kalibrasievergelyking 10 is bereken deur regressie-analise van die bepaalde piekarea en die bepaalde konsentrasie.
Kommersieel beskikbare koeimelkpoeier (20 monsters) en monsters van verskillende handelsmerke van koeimelk-gebaseerde babaformule (20 monsters) is by plaaslike supermarkte en apteke in Iran aangekoop vir die voeding van babas van verskillende ouderdomsgroepe (0–6 maande, 6–12 maande en >12 maande) en by verkoelde temperatuur (4 °C) gestoor tot analise. Daarna is 1 ± 0,01 g gehomogeniseerde melkpoeier geweeg en gemeng met asetonitriel:water (50:50, v/v; 5 ml). Die mengsel is vir 1 minuut geroer, daarna vir 30 minute in 'n ultrasoniese bad gesonikeer en uiteindelik vir 1 minuut geskud. Die mengsel is toe vir 10 minute by kamertemperatuur by 9000 × g gesentrifugeer en die supernatant is met 'n 0,45 μm spuitfilter in 'n 2 ml outomatiseerderflessie gefiltreer. Die filtraat (250 μl) is toe met water (750 μl) gemeng en op die HPLC-stelsel ingespuit10,42.
Om die metode te valideer, het ons die herwinning, akkuraatheid, deteksielimiet (LOD), kwantifiseringslimiet (LOQ) en presisie onder optimale toestande bepaal. Die LOD is gedefinieer as die monsterinhoud met 'n piekhoogte drie keer die basislynruisvlak. Aan die ander kant is die monsterinhoud met 'n piekhoogte 10 keer die sein-tot-ruisverhouding gedefinieer as die LOQ.
Die toestelrespons is bepaal deur 'n kalibrasiekurwe te gebruik wat uit sewe datapunte bestaan. Verskillende melamieninhoud is gebruik (0, 0.2, 0.3, 0.5, 0.8, 1 en 1.2). Die lineariteit van die melamienberekeningsprosedure is bepaal. Daarbenewens is verskeie verskillende vlakke van melamien by die blanko monsters gevoeg. Die kalibrasiekurwe is gekonstrueer deur 0.1–1.2 μg mL−1 van 'n standaard melamienoplossing voortdurend in babaformule- en poeiermelkmonsters in te spuit, en die R2 daarvan = 0.9925. Die akkuraatheid is beoordeel deur herhaalbaarheid en reproduceerbaarheid van die prosedure en is bereik deur monsters op die eerste en drie daaropvolgende dae (in drievoud) in te spuit. Die herhaalbaarheid van die metode is beoordeel deur die RSD % vir drie verskillende konsentrasies van bygevoegde melamien te bereken. Herwinningstudies is uitgevoer om die presisie te bepaal. Die graad van herwinning deur die ekstraksiemetode is bereken op drie vlakke van melamienkonsentrasie (0.1, 1.2, 2) in monsters van babaformule en droëmelk9,11,15.
Geraamde daaglikse inname (EDI) is bepaal met behulp van die volgende formule: EDI = Ci × Cc/BW.
Waar Ci die gemiddelde melamieninhoud is, Cc die melkverbruik is en BW die gemiddelde gewig van kinders is.
Data-analise is uitgevoer met behulp van SPSS 24. Normaliteit is getoets met behulp van die Kolmogorov-Smirnov-toets; alle data was nie-parametriese toetse (p = 0). Daarom is die Kruskal-Wallis-toets en die Mann-Whitney-toets gebruik om beduidende verskille tussen groepe te bepaal.
Ingelfinger, Jr. Melamien en die impak daarvan op globale voedselbesmetting. New England Journal of Medicine 359(26), 2745–2748 (2008).
Lynch, RA, et al. Effek van pH op melamienmigrasie in kinderbakke. Internasionale Tydskrif vir Voedselbesmetting, 2, 1–8 (2015).
Barrett, MP en Gilbert, IH Teiken van giftige verbindings na die binnekant van tripanosome. Progress in Parasitology 63, 125–183 (2006).
Nirman, MF, et al. In vitro en in vivo evaluering van melamien-dendrimere as geneesmiddelafleweringsmiddele. Internasionale Tydskrif vir Farmasie, 281(1–2), 129–132(2004).
Wêreldgesondheidsorganisasie. Kundige vergaderings 1–4 om die toksikologiese aspekte van melamien en sianiuriensuur te hersien (2008).
Howe, AK-C., Kwan, TH en Lee, PK-T. Melamien-toksisiteit en die nier. Tydskrif van die Amerikaanse Vereniging van Nefrologie 20(2), 245–250 (2009).
Ozturk, S. en Demir, N. Ontwikkeling van 'n nuwe IMAC-adsorbent vir die identifisering van melamien in suiwelprodukte deur middel van hoëprestasievloeistofchromatografie (HPLC). Journal of Food Synthesis and Analysis 100, 103931 (2021).
Chansuvarn, V., Panic, S. en Imim, A. Eenvoudige spektrofotometriese bepaling van melamien in vloeibare melk gebaseer op Mannich-groenreaksie. Spectrochem. Acta Deel A Mol. Biomol. Spectrosc. 113, 154–158 (2013).
Deabes, M. en El-Habib, R. Bepaling van melamien in babaformule, melkpoeier en pangasiusmonsters deur HPLC/diode-array-chromatografie. Journal of Environmental Analytical Toxicology, 2(137), 2161–0525.1000137 (2012).
Skinner, KG, Thomas, JD, en Osterloh, JD Melamien-toksisiteit. Tydskrif vir Mediese Toksikologie, 6, 50–55 (2010).
Wêreldgesondheidsorganisasie (WGO), Toksikologie en gesondheidsaspekte van melamien en sianiuriensuur: Verslag van 'n WGO/FAO-samewerkingsvergadering van kundiges ondersteun deur Gesondheid Kanada, Ottawa, Kanada, 1-4 Desember 2008 (2009).
Korma, SA, et al. Vergelykende studie van lipiedsamestelling en kwaliteit van babaformulepoeier wat nuwe funksionele strukturele lipiede bevat en kommersiële babaformule. Europese Voedselnavorsing en Tegnologie 246, 2569–2586 (2020).
El-Waseef, M. en Hashem, H. Verbetering van voedingswaarde, kwaliteitseienskappe en rakleeftyd van babaformule met behulp van palmolie. Middle East Journal of Agricultural Research 6, 274–281 (2017).
Yin, W., et al. Produksie van monoklonale teenliggaampies teen melamien en ontwikkeling van 'n indirekte mededingende ELISA-metode vir die opsporing van melamien in rou melk, droë melk en dierevoer. Journal of Agricultural and Food Chemistry 58(14), 8152–8157 (2010).